更新時間: | 2023-10-27 |
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廠商性質: | 生產廠家 |
提供商:上海研謹生物/杭州研謹生物服務名稱:免疫共沉淀(CHIRP)實驗規格:實驗服務價格:2000元周期:1-3個月
免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用于研究蛋白質相互作用的經典方法,是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有經翻譯后修飾的,處于天然狀態的優點。
免疫共沉淀(CHIRP)實驗意義
IncRNA可與蛋白質、DNA和RNA相互作用,實現多樣化功能,CHIRP可以探討IncRNA與其互作的DNA.蛋白質的功能與作用機制,是相關科學研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表觀遺傳調控等生命活動中發揮重要作用,CHIRP是研究
IncRNA的重要技術手段,可在全基因組范圍內鑒定RNA與染色質的互作,并對其進行定性、定量及定位的分析。
免疫共沉淀(CHIRP)實驗原理
CHIRP (Chromatin Isolation by RNA Purification)是通過結合生物素的核酸探針,將目標RNA拉下來,與之共同作用的DNA染色體片段(DNA與蛋白質復合體)就會被吸附下來,后可以通過qRT-PCR. WB.測序分析和質譜分析等檢測RNA. DNA和蛋白質。
CHIRP的實驗流程
①探針設計:設計反義穿核苷酸探針:
②細胞培養;
③破碎細胞:
④生物素標記的DNA探針與RNA雜交;
⑤CHIRP;
⑥RNA、DNA及核酸結合蛋白提取; .
⑦分析檢測。,
結果展示
實驗完成周期及交付標準
1.實驗周期: 1-3個月
2.交付標準: CHIRP鑒定結果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材、實驗步驟)、原始數據等
實驗需與客戶確認的信息
1.目的基因與蛋白信息。
2.樣本類型與種屬
3.是否需要生信分析
注意的問題:
(1)細胞裂解采用溫和的裂解條件,不能破壞細胞內存在的所有蛋白質-蛋白質相互作用,多采用非離子變性劑(NP40或Triton X-100)。每種細胞的裂解條件是不一樣的,通過經驗確定。不能用高濃度的變性劑(0.2%SDS),細胞裂解液中要加各種酶抑制劑,如商品化的cocktailer。
(2)使用明確的抗體,可以將幾種抗體共同使用。
(3)使用對照抗體:
單克隆抗體:正常小鼠的IgG或另一類單抗
兔多克隆抗體:正常兔IgG
實驗代做服務:
免疫組化IHC染色實驗服務 | 細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務 | 試劑盒免費代檢測 | 實驗室代做實驗項目 |
透射電鏡服務實驗服務 | 石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡 | 核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務 | 免疫共沉淀(CHIRP)實驗 |
RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做 | 酶聯免疫(ELISA)技術服務 | 雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒 | 喹諾酮類快速檢測試劑盒 |
組織芯片/微陣列定制技術服務 | 染色質免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務 | 多因子液相芯片技術(Luminex)實驗 | 免疫細胞化學ICC實驗服務 |
ATP/ADP檢測實驗服務 | 蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務 | 蛋白相互作用分析 | 堿性磷酸酶染色實驗服務 |
PKC活性檢測實驗 | 非標定量實驗 (Label-free) | DIGE技術實驗服務 | 端粒酶活性檢測實驗 |
細胞生長曲線的測定 | 掃描電鏡服務 | NF-KB p65活性檢測實驗 | 慢病毒包裝實驗服務 |