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植物總酚(TP)含量檢測試劑盒說明書
點擊次數:160 更新時間:2024-10-22

可見分光光度法

植物總酚(TP)含量檢測試劑盒說明書 貨號:YJS2309

規格:50T/24S

產品內容:

提取液:60%乙醇, 自備。

試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存。

試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

標準品:液體 1mL×1 支,4℃保存。1mg/mL 單寧酸標準溶液。

產品說明:

植物酚類物質具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有較高的營養價值和醫療保健作用而 廣泛應用于化妝品、食品、醫藥等領域。

在堿性條件下,酚類物質將鎢鉬酸還原,產生藍色化合物,在 760nm 處有特征吸收峰,測 760nm 處的吸光值,即可得樣品總酚含量。

自備實驗用品及儀器:

天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比 色皿、蒸餾水。

操作步驟:

一、總酚提取

將樣本烘干至恒重,粉碎,過 40 目篩之后,稱取約 0. 1g ,加入 2.5mL 提取液,用超聲提取法進 行提取,超聲功率 300W ,破碎 5s ,間歇 8s 60 , 提取 30min 12000rpm 25 , 離心 10min  取上清,用提取液定容至 2.5mL ,待測。

二、標準品制備

 1mg/mL 單寧酸標準溶液二倍稀釋至 0.31250.15620.07810.03910.01950.00980.0049 0.0024 0.0012 0.0006mg/mL ,待測。

三、測定操作表

1 、分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 760nm ,蒸餾水調零。

2 、操作表


對照管

測定管

標準管

空白管

樣本待測液 ( μL)

50

50


-

標準液 ( μL)



50


蒸餾水 ( μL)




50

試劑一 ( μL)

-

250

250

250

混勻,室溫靜置 2min

試劑二 ( μL)

250

250

250

250

蒸餾水 ( μL)

700

450

450

450

混勻,室溫靜置 10 min, 1mL 比色皿,測定 760nm 吸光值。

空白管只測一次。

四、總酚含量計算


1 、標準曲線繪制:

以不同濃度的單寧酸為 x 軸,ΔAA 標準-A 空白)為 y  軸繪制標準曲線 y= kx+b

2 、植物總酚含量計算:

ΔA=A 測定-A 對照帶入標準曲線,求 x(mg/mL)

1) 按樣本鮮重計算


總酚含量(mg/g  鮮重)= x×V 提取÷W= 2.5x÷W 2) 按樣本






蛋白濃度計算


總酚含量(mg/mg prot= x×V 提取÷V 提取×Cpr= x ÷Cpr

V 提取:提取液體積,2.5 mLCpr:樣本蛋白質濃度,mg/mLW:樣品質量g

注意事項:

1)OD 值大于 1.0 ,樣品適當稀釋再測定,注意計算公式里乘以稀釋倍數。

2)試劑一對皮膚有一定的刺激性,請操作時做好防護措施。

 

 

 

 

 


本產品僅供科學研究使用!請勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測等用途

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實驗技術服務:

 


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