ELISA免疫檢測獸藥殘留的技術(shù)
覃雅麗等制備了氯霉素單克隆抗體,Ci-ELISA的低檢測限為0.1 ng/mL.Stanker等制備了呋喃苯胺酸(利尿藥)單克隆抗體,并建立了檢測乳中呋喃苯胺酸的Ci-ELISA方法,檢測限為2 ug/kg.。Abad和Montoya用碳二亞胺法合成了兩種卡巴立(殺蟲藥)人工抗原,免疫BALA/c小鼠后獲得了抗卡巴立單克隆抗體,并在此基礎(chǔ)上建立了檢測卡巴立的Ci-ELISA方法。Tanaka等制備了大觀霉素多克隆抗體,Ci-ELISA方法的檢測限為2 ng/mL.
獸藥殘留的免疫檢測技術(shù)經(jīng)過近20年的發(fā)展,已經(jīng)取得了可喜的進(jìn)步,但也存在很多不足。總體說來,國外的獸藥殘留檢測無論是常規(guī)技術(shù)還是免疫技術(shù)的發(fā)展都滯后于農(nóng)藥和食品的殘留分析,而國內(nèi)這些都起步較晚,僅僅是初具規(guī)模,還沒有規(guī)范化和系統(tǒng)化。絕大多數(shù)獸藥殘留的免疫檢測方法都沒有建立。這既有國家對此的認(rèn)識不足,投資了度不夠等主觀原因,也受到其本身的客觀原因所限制。如藥物的人工抗原較難合成,且免疫檢測技術(shù)雖然有取樣量少、前處理簡單、容量大、儀器化程度低、分析成本低、效率高、靈敏等優(yōu)點(diǎn),但是所提供的待測物組成或結(jié)構(gòu)方面的信息太少,易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。未來獸藥殘留免疫檢測發(fā)展的主要趨勢在以下幾個方面。(1)集中人力物力制訂一系列的國家標(biāo)準(zhǔn),規(guī)范獸藥殘留免疫檢測的方法、步驟、試劑等和培訓(xùn)專業(yè)人員。(2)免疫檢測與其他常規(guī)方法的聯(lián)合可使殘留分析融免疫分析的高選擇性和理化分析的快速、靈敏性于一體,避免了單純免疫檢測樣本時信息太少,定量準(zhǔn)確性不足,或理化分析方法選擇性的弊端,使分析過程簡化,分析質(zhì)量得到改善。如先用免疫檢測對大批量樣品進(jìn)行篩選再用其他常規(guī)方法確證,或利用抗血清制備的免疫柱(IAC)先將樣品凈化再用常規(guī)方法分析等。(3)免疫檢測技術(shù)的發(fā)展也將帶動要理研究的發(fā)展,如藥物單抗與基因重組技術(shù)的聯(lián)合應(yīng)用可以反過來研究藥物的耐藥機(jī)制,有利于新藥的開發(fā)。
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